從病雞和許多外表正常的雞體中都不難分離出病毒株。供分離病毒用的首選樣品是腫瘤細(xì)胞、腎細(xì)胞以及脾或周圍血液的白細(xì)胞。由于mdv在這些組織中是高度細(xì)胞結(jié)合性的，所以必須用全細(xì)胞作為接種物。羽毛囊是從病雞中分離完整病毒粒子的唯一良好來源。被懷疑含有mdv的樣品，可以用接種易感雞、細(xì)胞培養(yǎng)物和雞胚的方法來分離病毒。
雛雞接種法：這是分離mdv最敏感的方法。選擇易感雞，在1日齡或l周齡內(nèi)用腹腔接種的途徑進(jìn)行感染，然后嚴(yán)格隔離飼養(yǎng)觀察。接種后經(jīng)18 -21天，對試驗雞連同相應(yīng)的陽性和陰性對照，進(jìn)行有無感染跡象的檢查。試驗應(yīng)至少持續(xù)10周。
細(xì)胞培養(yǎng)法：這種方法的敏感性雖不如雛雞接種法，但簡單易行，仍很有實用價值。首先要制備鴨胚成纖維細(xì)胞或雞腎細(xì)胞的培養(yǎng)物，最適宜的接種物是白細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞或血液。5 - 14天出現(xiàn)典型的mdv蝕斑，而對照培養(yǎng)物中不見這種變化，這就是分離到mdv的證據(jù)。這種特征性的蝕斑，由圓形和梭形的折光性細(xì)胞和含有cowdrva型核內(nèi)包涵體的多核細(xì)胞所組成。
雞胚接種法：通過卵黃囊或絨毛尿囊膜途徑接種病毒的雞胚，分別于接種后4-6天或10-11天在絨毛尿囊膜上產(chǎn)生痘樣病斑。
在實驗室診斷中，md的血清學(xué)試驗通常用瓊脂凝膠免疫擴(kuò)散試驗，檢測mdv抗原及其沉淀抗體。用熒光抗體法或酶抗體法檢查病雞組織中的病毒抗原、腫瘤細(xì)胞上的腫瘤相關(guān)性表面抗原(matsa)，也可檢測血清抗體。用已知md陽性血清作瓊擴(kuò)試驗檢查羽毛囊抗原，操作十分簡便。從被檢雞身上拔下幾根含羽髓的羽毛，剪下含羽髓的部分放入小青瓶內(nèi)，用玻璃棒進(jìn)行適當(dāng)擠壓浸提后，即可用于試驗。此法敏感性高，人工感染mdv的雞，在接種20天后，羽髓抗原陽性率可達(dá)90%以上。用已知mdv抗原作瓊擴(kuò)試驗檢測血清抗體的方法，可用于來免疫發(fā)病的診斷，也可用于流行病學(xué)調(diào)查。
病毒中和試驗( vn)或蝕斑減少試驗可用于檢測感染雞血清的中和抗體。
