近年來(lái)國(guó)內(nèi)隨著魚病防治工作的加強(qiáng),一些技術(shù)用于魚病的診斷,魚病診斷技術(shù)正在向健康、快速、準(zhǔn)確的方向發(fā)展。目前主要有以下幾種診斷技術(shù)。
1、熒光抗體技術(shù)(fat、免疫熒光技術(shù))
是在免疫學(xué)、生物化學(xué)和顯微鏡的基礎(chǔ)上建立起來(lái)的一項(xiàng)技術(shù),以熒光色素標(biāo)記病魚的抗原或抗體,與其相應(yīng)的抗原或抗體相結(jié)合,在熒光顯微鏡下呈現(xiàn)一種特異性的熒光反應(yīng)。
該技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是:特異性強(qiáng),敏感性高,檢出速度快。缺點(diǎn)是:非特異性染色尚未完成解決,結(jié)果判斷的客觀性不足,技術(shù)程序比較復(fù)雜。
2、免疫酶技術(shù)(eat)
是根據(jù)抗原和抗體特異性結(jié)合,以酶作為標(biāo)記物,酶對(duì)病魚底物具有高效催化作用的原理建立的。酶標(biāo)抗體或抗原與其相對(duì)應(yīng)的抗原或抗體相結(jié)合后,形成酶標(biāo)抗體一抗原復(fù)合物。復(fù)合物酶遇到相當(dāng)應(yīng)的底物時(shí),底物被氧化分解,生成有色物質(zhì)。
可用顯微鏡或光電比色定性、定量檢測(cè)相對(duì)應(yīng)抗原或抗體。此法靈敏度高,標(biāo)本易久存。
3、中和試驗(yàn)技術(shù)
是測(cè)定魚類的抗體或抗原中和抗原或抗體的能力。主要用于病毒鑒定和病毒性抗體的測(cè)定及查獲無(wú)征象的帶病魚。
4、對(duì)流免疫電泳技術(shù)
是一種瓊脂擴(kuò)散與電泳原理,用以分析魚類免疫血清或抗原組分的有效方法,可在30—90分鐘內(nèi)檢出抗體。
5、反向間接血球凝集反應(yīng)技術(shù)
是當(dāng)顆粒性(如細(xì)菌)和相應(yīng)抗體結(jié)合后,在電解質(zhì)存在的條件下出現(xiàn)凝集反應(yīng)??捎媚磻?yīng)測(cè)定病魚中抗體效價(jià)。
6、核酸探針技術(shù)
其原理為堿基配對(duì),互補(bǔ)的兩條核酸鏈通過(guò)退火形成雙鏈,這一過(guò)程稱為核酸雜交。